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宁波大学 2016 年攻读硕士学位研究生
入 学 考 试 试 题(A 卷) (答案必须写在答题纸上)
考试科目: 分子生物学 科目代码： 941
适用专业: 海洋生物学、生物化学与分子生物学
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一、名词解释（40 分，每个 4 分）
NCBI、mutiple cloning site、nested-PCR、genetic central dogma、RNA splicing、intron、gene family、
trans-acting factor、Klenow fragment、microsatellite DNA
二、问答题（50 分）
1、简述原核生物 DNA 复制过程中需要哪些酶和蛋白的参与，各具有何作用？（10 分）
2、原核生物基因转录的终止子的种类及作用机制。（10 分）
3、真核生物 mRNA 与原核生物 mRNA 的区别。（10 分）
4、试比较原核生物和真核生物启动子结构的差别。（10 分）
5、简述乳糖操纵子调节机制。（10 分）
三、分析题（60 分）
1. 简述 RNA 提取方法，并描述如何确定提取 RNA 的质量？（15 分）
2. 简述 SDS-PAGE 电泳和 Western blot 检测流程？（15 分）
3. 引物设计题：已知下列序列，请根据此序列下划线标示区设计上下游引物。（10 分）
GAGGTTGTTCGAAGGATTGGAACCGGTATAAGGGCGTTAGACGGCG……..CCTTCTACGACGTCGTCGT
CTTCTTCTTCTTCTTCGTCTGAACAATAGTGGACGAACCACG
4. 现要求在大肠杆菌(Escherichia coli) BL21 中表达 A 基因。（20 分）
1）选择 pET28a 为原核表达载体，假定某基因 A 的 ORF 序列中包含下列限制性内切酶位点 BamH
I、Hind III、Sac I。pET28a 的多克隆位点如下：
请为基因 A 原核表达选择合适的限制性内切酶位点。
2）请写出实现 A 基因在大肠杆菌中表达的实验流程。
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