基因工程原理是报考生物化学与分子生物学硕士点的考试科目之一。为帮助考生明确考试复习范围和有关要求，特制定本考试大纲。

　　二、考试范围和内容

　　第一章  基因与基因工程

　　1、基因研究的发展

　　了解：基因学说创立及其研究的发展

　　2、基因的现代概念

　　掌握：移动基因、断裂基因、假基因、重叠基因等概念

　　3、基因工程的诞生及主要研究内容

　　了解：基因工程的诞生与发展

　　基因工程的定义及主要研究内容

　　第二章  基因操作的主要技术原理

　　1、核酸的凝胶电泳

　　掌握：基因原理

　　了解：琼脂糖凝胶电泳和脉冲场凝胶电泳

　　2、核酸分子杂交

　　掌握：Southern blotting、Northern blotting、West blotting及原位杂交的原理与方法。

　　3、细菌转化

　　理解：细菌转化的概念与方法

　　4、DNA核苷酸序列分析

　　掌握：Sanger双脱氧链终止、Maxam-Gilbert化学修饰法测序的原理。

　　理解：DNA序列分析的自动化和DNA杂交测序的方法。

　　5、基因的化学合成

　　了解：化学合成的原理与方法。

　　6、基因的定点诱变

　　掌握：盒式诱变、寡核苷酸诱变、PCR诱变的原理与方法。

　　7、基因的扩增

　　掌握：PCR技术的原理与方法、寡核苷酸引物的概念。

　　了解：PCR技术的研究应用。

　　第三章  基因克隆的酶学基础

　　1、核酸内切限制酶与DNA分子的体外切割

　　掌握：核酸内切限制酶的类型、II型核酸内切限制酶的基本特性。

　　了解：影响核酸内切酶活性的因素及对DNA的消化作用。

　　2、DNA连接酶与DNA分子的体外连接

　　掌握：DNA连接酶的种类及体外连接的方法。

　　3、DNA聚合酶

　　了解：主要DNA聚合酶的特性与功能。

　　理解：DNA杂交探针的制备。

　　4、DNA及RNA的修饰酶

　　理解：末端转移酶、碱性磷酸酶、T4多核苷酸激酶的特性与功能。

　　5、核酸外切酶

　　了解；核酸外切酶III、核酸外切酶VII的特性与功能。

　　6、单链核酸内切酶

　　了解：S1核酸酶、Bal31核酸酶的特性与功能。

　　第四章  基因克隆的质粒载体

　　1、质粒的一般生物学特性

　　了解：质粒的类型、分子的构型及质粒DNA的转移与迁移作用。

　　2、质粒DNA的复制与拷贝数的控制

　　理解：质粒复制的多样性

　　3、质粒DNA的分离与纯化

　　掌握质粒DNA分离的方法。

　　4、质粒载体的构建与类型

　　掌握：质粒载体构建的必备基本条件

　　理解：表达型的质粒载体。

　　5、重要的质粒载体

　　理解：pSC101、pBR322、pUC等重要质粒载体的性质与功能。

　　第五章  噬菌体载体和柯斯载体

　　1、噬菌体的一般生物学特性

　　了解：噬菌体的类型、结构与性质

　　2、λ噬菌体载体

　　了解：构建λ噬菌体载体的基本原理

　　掌握：λ噬菌体载体的主要类型。

　　3、单链噬菌体载体

　　了解：M13噬菌体载体的性质与功能。

　　4、柯斯质粒载体

　　了解：柯斯质粒载体的特点

　　5、噬菌粒载体

　　掌握：噬菌粒载体的概念。

　　了解：pUC118、pUC119

　　第六章  基因的分离与鉴定

　　1、DNA克隆片断的产生与分离

　　了解：基因组DNA片断化及富集的方法

　　2、重组体DNA分子的构建及导入受体细胞

　　掌握：外源DNA片断同载体分子重组的原理与方法。

　　掌握：重组分子导入受体细胞的方法。

　　3、基因克隆的实验方案

　　掌握：cDNA基因克隆的方法、

　　理解：全基因组文库克隆

　　了解：基于分子遗传图谱的基因定位克隆

　　4、克隆基因的分离

　　理解：核酸探针分离基因的方法

　　掌握：差别杂交、扣除杂交分离基因的原理

　　了解：mRNA差别显示的原理与基本过程、表达文库分离克隆基因

　　5、重组体分子的选择与鉴定

　　掌握：抗药性标记选择、β-半乳糖苷酶显色反应选择法

　　理解：菌落或噬菌斑杂交筛选法、免疫化学检测法。

　　第七章  基因的表达与调控

　　第八章  植物基因工程

　　1、植物基因克隆与分离

　　了解：植物基因克隆与分离方法

　　2、植物基因工工程研究中常用的基因

　　了解：选择标记基因、报告基因、抗虫抗病基因等

　　3、植物基因转移的质粒载体

　　了解：Ti质粒的特性、T-DNA的结构与功能

　　理解：Ti质粒载的构建

　　4、培育转基因植物的方法

　　掌握：农杆菌介导的植物细胞转化法

　　了解：生物弹击法、花粉管导入法。

　　第九章  动物基因工程

　　1、外源DNA导入动物细胞的方法

　　了解：磷酸钙转染技术、显微注射技术、电穿孔技术、脂质体法

　　理解：反转录病毒感染法

　　三、考试要求

　　考生应全面掌握基因工程原理的基本概念，理解主要的原理和基本方法，了解发展历史与最新研究动态。综合运用所学的知识和理论解决较复杂的问题。

　　四、试卷结构

　　基本概念和知识占30%

　　基本原理和方法占40%

　　综合运用知识占30%

　　五、考试方式和时间

　　方式：笔试

　　时间：3小时

　　六、参考书

　　基因工程原理（上、下册），吴乃虎编著（第二版），科学出版社，1998年（上册）\2001年（下册）。