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fascin1蛋白篇一
1材料与方法
1.1试验材料
配制三种不同蛋白水平的饲料,分别是28%、32%和40%(见表1)。试验鱼购自东源城区鱼苗繁殖场,规格为7.14~7.69g/尾的健康斑点叉尾鮰。
1.2饲养管理
本试验在东源县鱼苗繁殖场基地的9口水泥池进行,对水泥池进行编号。选择健康斑点叉尾鮰的幼鱼,随机放养在长×宽×深为2m×2m×2m的9口水泥池,每池放养250尾,每组饲料设3个重复,随机分组。试验开始前驯养7天,随后投喂3种试验饲料,日投喂量为鱼体重的2.5%~4.0%。每天投喂两次(分别是早上9:00,下午18:00),饲养周期为2个月。整个养殖过程要注意水质调控和疾病防治,控制水温在25℃~30℃,ph值为6~8,溶氧大于5mg/l,氨氮控制在0.5mg/l以下。
1.3测定指标
试验开始后,每隔15天每组随机选取20~30尾鱼测定体重、体长和肝重,计算增重率、肥满度、饲料系数和肝体比,直到养殖过程全结束。相关指标的计算公式如下:(略)。
1.4试验数据处理
采用spss(17.0)软件对所得数据进行单因素方差分析,进行差异显著性检验,结果用(平均值±标准误)表示。试验鱼经2个月的饲养,各组成活率均超过90%,且无显著差异(p>0.05);随着蛋白水平的升高,鱼的增重率呈升高的趋势(见图2),且各试验组之间均有显著差异(p<0.05)。饵料系数随着饲料蛋白水平的升高呈下降趋势,各组之间均达到显著水平(p<0.05)。肥满度方面,各试验组之间均有显著差异(见表2)。肝体比随着饲料蛋白水平的升高呈下降趋势,且各试验组之间均有显著差异(p<0.05)(表2所示)。
2讨论
关于斑点叉尾鮰的营养需求研究较多,金明昌(2008)综述了这一方面的进展。蛋白质是构成斑点叉尾鮰鱼体的主要成分,斑点叉尾鮰蛋白质需求量是其配合饲料研究的重要内容。斑点叉尾鮰对蛋白质的需要量一般为24%~55%,一般幼鱼高于成鱼。对比3种不同蛋白水平的等能全价配合饲料,饲养斑点叉尾鮰幼鱼2个月,因饲料蛋白水平在其需要量范围内,并未导致3种不同蛋白水平的实验鱼的成活率有显著差异。饲料蛋白水平40%的饲养组鱼体增重率显著高于32%、和28%饲料组;蛋白水平40%的饲料组饵料系数显著低于32%和28%,总的来说饲料蛋白水平40%的饲养组鱼体增重率和饵料系数均优于其他饲料组。本试验表明在饲料蛋白含量在一定水平内,蛋白含量高对斑点叉尾鮰生长越有利。这与潘庭双等(2007)的研究结果一致。
肥满度又称丰满系数,在一定意义上可以理解为含肉率,是评价鱼类生长状况优劣的指标。关于斑点叉尾鮰的肥满度,前人已有一定的研究(潘庭双等,2008)。早期幼鱼呈现肥满度低,表示将营养更多用于骨骼生长,减少鱼肉生长,对育苗的后续生长更加有利。实验结果表明,各试验组肥满度均有显著差异,饲料蛋白水平为40%时优于其他饲料组。
肝脏是鱼类代谢的主要器官,同时也是鱼类重要的营养储存器官,鱼类的肝体比是对长期和短期营养方式都有敏感的指标,在营养变动、营养不良或营养过剩时,肝脏质量会发生显著变化。肝胆综合征是近年来养殖鱼类的多发病,较难治愈,病因就与营养有关,其明显症状就是肝脏偏大,实验表明,随着饲料蛋白水平的增加,肝体比逐渐减小,饲料蛋白水平40%的饲养组肝体比与28%的饲养组有显著差异。
fascin1蛋白篇二
本文作者:杜勇、陈宇、李浩渤 单位:河北医科大学第二医院口腔内科、河北省廊坊市人民医院口腔科
口腔扁平苔藓(orallichenplanus,olp)是口腔黏膜一种常见的非感染性慢性炎症,目前被认为是细胞介导的自身免疫性疾病。国内外研究相继表明olp具有癌变倾向,其癌前性质引起广泛关注[1]。fascin蛋白是一种细胞骨架蛋白,fascin蛋白的异常表达可引起肿瘤细胞运动性显著增强和细胞黏附能力的改变,使肿瘤细胞具有更强的侵袭性,进入淋巴间隙,淋巴管和血管,增加转移几率。研究发现fascin蛋白在多种肿瘤组织和癌前病变组织中呈现阳性表达,其阳性表达的肿瘤组织学分级或者侵袭性往往较高[1-3]。进一步的研究发现fascin蛋白在口腔白斑和口腔鳞状细胞癌中呈现过高表达[4,5]。本研究通过免疫组化的试验方法检测fascin蛋白在olp中的表达,进一步探讨olp癌变的发病机制,为olp癌变的早期诊断和治疗提供依据。
1资料与方法
1.1一般资料
收集河北医科大学第二医院1995至2009年olp蜡块标本52例(所有患者在取标本前未经任何治疗)为试验组(olp组),每例标本均进行he染色后经有经验的病理医师阅片后确诊。其中男28例,女24例;年龄38~73岁,平均年龄52.6岁。正常口腔黏膜组织41例为对照组(nm组),均取自囊肿旁及牙槽骨整形手术时切除的正常黏膜组织,每例均进行he染色后经有经验的病理医师阅片后确诊。其中男22例,女19例;年龄21~68岁,平均年龄31.6岁。2组一般资料有均衡性。
1.2主要试剂与仪器
试剂:sp免疫组化试剂盒、一抗(购自博士德分装抗体)、二氨基联苯剂(dab)显色剂、多聚赖氨酸(poly-l-lysine)防脱片剂均购于河北博海生物有限公司。仪器:显微镜(日本奥林巴斯bx51t-phd-j11)、cmos(日本奥林巴斯)、多功能真彩色细胞图象分析管理系统(美国mediacy-bernetics公司image-proplus)、切片机(德国莱卡rm2015)、离心机(北京离心机厂ldz5-2型)、电子天平(瑞士metterae100型)、移液器(德国eppendorf)、干燥箱(日本三洋mir-153型)、低温冰箱(日本三洋mdf-382e型)、恒温水浴箱(江苏太仓医用仪器厂dshz-300型)、医用微波炉(浙江临安爱迪仪器厂ywy781b型)。
1.3对照试验
用已知的fascin蛋白阳性的口腔鳞癌标本作为阳性对照,以磷酸盐缓冲液(pbs)代替一抗作为阴性对照。
1.4试验方法
采用免疫组织化学sp法(过氧化物酶标记的链酶卵白素法)。所有标本均经10%甲醛固定,石蜡重新包埋后,将每个蜡块切为5μm的切片,共切3张,1张he染色,1张作为阴性对照,1张fascin蛋白染色。
1.5结果判定
fascin蛋白染色判定参照hashimoto的标准,以细胞膜和细胞浆显示弥漫性棕黄色颗粒为阳性染色,每张切片随机计数10个高倍视野,每个视野计数100个细胞。据阳性细胞百分率判定:(1)未见棕黄色颗粒为阴性;(2)<25%为弱阳性(+);(3)25%~75%为阳性(++);(4)>75%为强阳性(+++)。1.6统计学分析应用spss17.0统计软件,计数资料比较采用2检验,p<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.12组fascin阴性率比较
黏膜标本中均呈阴性表达;nm组标本呈现弱阳性表达(阳性细胞数<25%),细胞膜和细胞浆显示弥漫性棕黄色颗粒,其余均呈现阴性表达,阳性率为9.62%,阳性率高于nm组(2=4.166,p<0.05)。图1、2。
2.2olp组fascin蛋白与性别、年龄的关系
在性别和年龄的对照中,fascin蛋白在口腔扁平苔藓中的表达差异无统计学意义(p>0.05)。见表1。
3讨论
fascin蛋白在细胞的迁移、黏附等过程中发挥重要作用。fascin蛋白能够与f-肌动蛋白结合成平行有序的束状结构,这种结构能够有效地加强肌动蛋白细胞骨架,抵抗细胞迁移时由细胞突起的运动引起的细胞膜延伸,从而对细胞移动起着重要作用。fascin蛋白的表达与肿瘤的分化增殖、细胞迁移及浸润侵袭密切相关,为肿瘤早期诊断和预后的判定提供重要的依据。研究证实fascin蛋白在正常黏膜中不表达或低表达,而在癌组织中高表达[1-3]。国内试验证实口腔鳞状细胞癌的fascin蛋白表达显著高于正常黏膜组织[4,5]。王德明[5]还发现在癌旁正常的口腔黏膜组织中也有fascin蛋白的表达,12例口腔黏膜良性增生组织中2例出现fascin蛋白表达。但未见报道在癌前病变olp中fascin蛋白的表达情况。本实验应用免疫组织化学法检测了fascin蛋白在41例正常口腔黏膜标本和52例olp标本中的表达。nm组中fascin蛋白均呈阴性表达;olp组中5例标本呈现弱阳性表达(阳性细胞数<25%、细胞膜和细胞浆显示弥漫性棕黄色颗粒),其余均呈现阴性表达,阳性率为9.62%,阳性表达率高于正常口腔黏膜(p<0.05),这与以往的研究[6]相近,正常食管黏膜中fascin蛋白呈阴性表达或低表达,而在癌前病变食管黏膜的不典型性增生中fascin蛋白呈现阳性表达,随着食管癌的发展fascin蛋白的阳性表达是逐渐增强的。本实验结果显示olp中fascin蛋白的阳性率高于正常口腔黏膜,说明olp存在潜在恶变的可能,fascin蛋白可能在olp恶变的过程中发挥一定的作用。但尚不能揭示fascin蛋白与olp恶变存在直接关系,fascin蛋白在olp恶变发生发展中的具体作用机制仍需要进一步的研究。
fascin1蛋白篇三
丙型肝炎病毒(hepatitiscvirus,hcv)和人类免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus,hiv)的传播途径十分相似,约30%的hiv阳性患者合并hcv感染。在中国的静脉药瘾的hiv感染者中,hcv阳性率可高达90%。hcv患者合并感染hiv将加速丙型肝炎病程进展,同时降低抗hcv疗效。近年较多研究表明,对合并感染患者针对hiv进行严格的高效抗逆转录病毒治疗(highlyactiveantiretroviraltherapy,haart)不能有效地改善这些情况,同时hcv病程加速也与cd4+t淋巴细胞数量下降无明显关联。我们前期的研究也证实,hiv合并感染可能导致患者体内hcv准种分布特征改变,但hcv载量及准种复杂度与cd4+t淋巴细胞数量无关。以上证据提示hiv对hcv的影响可能存在其他途径。有研究证实hcv、hiv可以共感染同一肝细胞,进而可能导致两种病毒在同一细胞内发生相互作用。hcv、hiv均为rna病毒,而ddx3在人体细胞内与rna的复制过程关系密切,已有研究证实ddx3可与hcvcore蛋白结合促进hcv的复制。同时发现hiv-1rev蛋白可与ddx3结合在核膜上形成复合体从而导致细胞质内ddx3的水平下降,也有研究表明,rev蛋白可以与hcv5'-utr作用直接促进hcv的复制。但是尚未有研究证实rev蛋白可以通过间接作用影响hcv的复制,或通过影响其他细胞代谢途径影响hcv的复制,也没有研究证实rev蛋白和ddx3可以共同作用并对hcv的复制产生影响。
本实验通过分别构建hcvrna复制细胞模型及表达ddx3、rev+ddx3的hcvrna复制细胞模型,研究rev蛋白和ddx3对hcvrna复制的影响。旨在为进一步深入研究rev蛋白和ddx3是否通过共同作用,从而影响hcvrna复制。
1材料与方法
1.1材料
huh7肝癌细胞系和hcv复制模型pcdna3.1-jfh1均为本实验室保存,huh7细胞系生长于含10%灭活小牛血清、2mmol/l谷氨酰胺、氨苄青霉素(100u/ml)、链霉素(100u/ml)和dmem培养基中,37℃、5%co2条件下培养。实验中主要材料包括:真核过表达质粒pcdna3.1(鼎国生物技术有限公司,北京),各种工具酶、核酸标准分子量marker以及蛋白质预染marker(天根生化有限公司,北京),去内毒素质粒大量提取试剂盒(qiagen公司,德国),质粒转染转染试剂lipofectamine2000(invitrogen公司,美国),鼠抗flag单克隆抗体(sigma公司,美国)、兔抗人gapdh单克隆抗体、小鼠抗人ddx3单克隆抗体、小鼠抗hivrev单克隆抗体(abcam公司,美国),hrp标记的羊抗兔igg二抗,hrp标记的羊抗小鼠igg二抗(福州迈新公司中国),qpcr引物由invitrogen公司合成。
1.2方法
1.2.1含rev、ddx3基因重组真核表达载体的构建查询ncbi获得rev蛋白和ddx3的基因表达序列,并分别在其基因的5'端引入限制性酶切位点ecorⅰ和增强表达的kozak序列,3'端引入限制酶切位点xbaⅰ和便于rev、ddx3表达检测的flag标签蛋白(dykddddk)编码序列,以及便于观察转染效率的mcherry和yfp序列。以上相关基因序列由深圳华大生物科技有限公司协助合成。进一步分别将各自基因序列插入真核过表达载体pcdna3.1中命名为pcdna3.1-rev-flag-mcherry、pcdna3.1-ddx3-yfp-flag。从genbank中查询目的基因以及上下游的序列,用vectornti软件进行pcr引物设计。载体pcdna3.1-rev-flag-mcherry正向引物(5'-agtccagtgtggtggaattcgccaccatggagccagtagatcctag-3')(含同源重组序列、ecorⅰ酶切位点、kozak序列,并含有目的基因5'端配对序列),(5'-tagtccatggtggcgaattcttctttagttcctgactccaatac-3')(含同源重组序列、ecorⅰ酶切位点,并含有目的基因3'端配对序列)。载体pcdna3.1-ddx3-yfp-flag正向引物5'-acgatgacgataagctcgaggccaccatgagtcatgtggcagtgg-3'(含同源重组序列、xhoⅰ酶切位点、kozak序列,并含有目的基因5'端配对序列),反向引物5'-gtttaaacgggccctctagatcagttaccccaccagtcaac-3'(含同源重组序列、xbaⅰ酶切位点,并含有目的基因3'端配对序列)。
1.2.2重组pcdna3.1-rev-flag-mcherry、pcdna3.1-ddx3-yfp-flag质粒的鉴定用构建好的重组pcdna3.1-rev-flag-mcherry、pcdna3.1-ddx3-yfpflag质粒分别转化入大肠杆菌dh5α中,均匀涂布接种于含有氨苄青霉素的琼脂糖平板上,次日挑取阳性单克隆菌落摇菌扩增后,抽提质粒进行pcr扩增并进行琼脂糖凝胶电泳,对扩增产物进行回收,并进行核酸测序。
1.2.3重组pcdna3.1-rev-flag-mcherry、pcdna3.1-ddx3-yfp-flag及pcdna3.1-jfh1质粒的转染采用lipofectamine2000转染试剂,实验步骤按照使用说明书进行操作。将重组pcdna3.1-rev-flagmcherry、pcdna3.1-ddx3-yfp-flag质粒分别瞬时转染入huh7细胞中,通过荧光显微镜观察转染效率。pcdna3.1-jfh1瞬时转染入huh7细胞中,qpcr检测hcv的复制情况。
1.2.4westernblot鉴定rev、ddx3基因在huh7细胞中的表达分别转染48h后,提取细胞总蛋白,进行sds-page电泳。在4℃下、300ma恒流条件下电转120min,用封闭液(含5%脱脂牛奶的tbst)室温封闭pvdf膜1h,tbst洗膜3次,每次10min,一抗加入1∶5000比例稀释的anti-rev单克隆抗体4℃孵育过夜,tbst洗膜3次,每次10min,二抗加入1∶5000比例稀释的辣根过氧化物酶标记的羊抗兔igg抗体室温孵育2h,tbst洗膜3次,每次10min。化学发光试剂检测,以gapdh为内参。
1.2.5qpcr检测细胞内rev、ddx3对hcv复制的影响用lipofectamine2000转染试剂,实验按照使用说明书进行操作。将pcdna3.1-ddx3-yfp-flag和pcdna3.1-jfh1瞬时共转染入huh7细胞中,qpcr检测hcv复制情况。将pcdna3.1-rev-flag-mcherry、pcdna3.1-ddx3-yfp-flag及pcdna3.1-jfh1瞬时共转染入huh7细胞中,qpcr检测hcv复制情况。查询ncbi中hcv基因组序列,以5'非翻译区为模板设计引物,引物序列为hcv-f:5'-ccctgtgaggaactactgtctt-3';hcv-r:5'-tgagcgggtttatccaag-3'。引物序列由美国invitrogen公司合成。扩增条件为95℃预变性1min,95℃变性10s,58℃退火扩增30s,循环40次,最后添加65~95℃溶解曲线。标准曲线:取1μgpcdna3.1-jfh1按10倍梯度稀释5个梯度后按上述体系进行real-timepcr检测,最终将每个梯度的ct值带入对应终浓度计算函数,最终以该函数计算每个样品中对应的hcv复制水平。
1.3统计学处理
采用spss17.0进行统计,实验组与对照组采用两独立样本t检验检测均值是否有显著性差异。
2结果
2.1重组pcdna3.1-rev-flag-mcherry、pcdna3.1-ddx3-yfp-flag真核表达载体的鉴定含pcdna3.1-rev-flag-mcherryg质粒的菌液经扩增培养后提取纯化质粒,进行pcr鉴定,产物经5%琼脂糖凝胶电泳,分别出现1条特异性条带,均位于400bp附近。核酸序列测定结果显示,克隆的外源基因全长394bp。含pcdna3.1-ddx3-yfp-flag质粒的菌液经扩增培养后提取纯化质粒,进行pcr鉴定,产物经5%琼脂糖凝胶电泳,分别出现2条特异性条带,分别位于2000bp附近,选择与预期产物大小接近的条带进行胶回收并测序。核酸序列测定结果显示,克隆的外源基因全长2035bp。通过对克隆的外源基因序列测序并和genbank中rev和ddx3序列对比,证实其基因序列100%同源,提示rev和ddx3真核表达载体构建成功。
2.2rev、ddx3基因分别在huh7细胞中的表达重组pcdna3.1-rev-flag-mcherry、pcdna3.1-ddx3-yfp-flag质粒分别转染huh7细胞,转染24h后用荧光显微镜观察荧光,可见rev在荧光显微镜下发红光,ddx3在荧光显微镜下发黄光;转染48h后提取细胞总蛋白,通过westernblot检测rev蛋白和ddx3的表达,凝胶成像仪成像结果证明重组pcdna3.1-rev-flag-mcherry、pcdna3.1-ddx3-yfp-flag质粒能在huh7细胞中表达相应的蛋白。
2.3ddx3对细胞hcv复制的影响重组pcdna3.1-ddx3-yfp-flag和pcdna3.1-jfh1质粒共转染huh-7细胞,48h后用trizol法提取细胞总rna,qpcr检测hcv的复制水平,进行对照组与实验组的两独立样本t检验。结果表明,瞬时转染ddx3和hcv复制质粒后,hcv的复制水平(1.09×107±0.18×107)明显高于hcv复制质粒单独转染后的hcv复制水平(4.79×106±1.24×106)(p=0.03)。提示,ddx3可以增强hcv在细胞中的复制。
2.4rev和ddx3共同作用对细胞hcv复制的影响重组pcdna3.1-rev-flag-mcherry、pcdna3.1-ddx3-yfp-flag和pcdna3.1-jfh1质粒共转染入huh-7细胞中,转染48h后,提取细胞总rna,进行qpcr检测hcv的复制水平,进行对照组与实验组的两独立样本t检验。结果表明,rev、ddx3和hcv复制质粒共转染huh-7细胞后,hcv的复制水平(1.74×107±0.40×107)明显低于hcv单独转染后的hcv复制水平(4.17×107±0.46×107)(p<0.001)。rev蛋白和ddx3共同作用可以抑制hcv的复制。
3讨论
有研究证实循环血液中的hivgp120蛋白在与肝细胞表面ccr5和cxcr4接触后可激活肝细胞内tgfβ-1表达从而促进肝细胞内hcv的复制。有研究发现可以从cd4-cxcr4+的原代肝细胞中成功分离出hiv;并且fromentin证实cd4-cxcr4-的某些肝癌细胞株也可以感染hiv。证明hiv和hcv可共感染同一肝细胞,表明二者有产生直接作用的可能。在hiv、hcv共感染的患者中,hiv可以促进hcv的复制,而且加速肝纤维化的进程。hiv合并hcv感染患者与hiv单独感染患者比较,肝脏相关疾病是非aids引起死亡的主要原因。最新的研究表明,hiv和hcv合并感染加速疾病的进程,特别是hiv感染增加hcv的复制、肝细胞凋亡、肠道微生物的移位、损伤hcv的特异性免疫应答。对hiv合并hcv的患者分别进行hiv的抗病毒治疗和hcv的抗病毒治疗,结果表明抗病毒治疗有效的延缓了肝纤维化的进程并减少了hiv合并hcv感染的患者终末期肝病的并发症。然而hiv合并hcv感染的患者接受常规的peg-ifn联合利巴韦林治疗所产生的持续性病毒学应答要比单独hcv患者有明显的降低。
有研究表明,在hiv-1致病过程中,rev蛋白发挥着重要作用,其可以促进hiv-1病毒颗粒的产生,并可以抑制病毒所有调节蛋白的产生。因hiv和hcv在细胞复制中无法自身合成rna解旋酶,其在细胞中的复制需要细胞内的rna解旋酶参与。ddx3属于dead解旋酶家族,ddx3参与多种细胞进程,包括mrna的剪接和转录、翻译的起始和rna的转运。有研究显示,ddx3可以与hiv-1中的tat蛋白作用,刺激病毒mrna的翻译,也可以和rev蛋白作用参与rev-rre介导的输出作用。有研究表明ddx3与hcvcore蛋白结合促进hcv的复制。同时也有学者发现hiv-1rev蛋白可与ddx3结合在核膜上形成复合体从而影响细胞质内ddx3的水平。也有研究发现rev蛋白可以与hcv5’-utr作用直接促进hcv的复制。但是尚未有研究证实rev可以通过间接作用影响hcv的复制,也没有研究证实rev蛋白和ddx3共同作用对hcv的影响。
本研究证实pcdna3.1-rev-flag-mcherry、pcdna3.1-ddx3-yfp-flag可以在真核细胞中表达;转染后48hqpcr检测发现,ddx3单独与hcv作用时,可以促进hcvrna的复制;当rev和ddx3共同作用于hcv时,可以有效抑制hcvrna的复制。可能原因:①rev和ddx3在细胞中结合形成复合物,降低了细胞内ddx3的水平,降低了ddx3对hcvrna的复制作用,从而竞争性抑制了ddx3对hcv复制的影响;②也有可能通过抑制某些信号通路从而影响hcvrna的复制,因为rev和ddx3不仅在hcv的表达中起作用,而且参与细胞中的多种信号通路,rev和ddx3形成复合物后也抑制了相应的信号通路,导致hcvrna的表达量下降;③或者改变了rev和ddx3在细胞中的分布,导致它们无法在指定的作用位点与hcv进行相互作用,从而导致hcvrna表达量的下降。
fascin1蛋白篇四
自20世纪80年代以来,特别是“十一五”时期,在中国经济腾飞过程中,钢铁工业生产规模和技术装备水平大幅度提高,产业升级步伐加快,特殊钢生产能力显著增强。“十一五”时期,我国粗钢产量由3.5亿t增加到6.3亿t,年均增长率12.2%,产量接近世界总产量的50%(见图1)。2010年,中国特钢产量3500万t,占钢产量的6%。伴随着钢铁工业的快速发展,我国对于钢铁工业重要合金元素之一的钼消费急剧攀升,中国一跃成为世界最大的钼消费国,年消费量由2006年的2万多吨猛增到2010年的约6万t,年均增长率为14.1%。
钢铁工业结构调整使中国含钼钢具备较大增长空间
尽管我国已是世界最大的产钢国,但是钢铁工业整体技术水平和产品实物质量仍然不够高。作为钼主要应用领域的特钢生产与世界先进水平相比仍有一定差距。我国特钢产量占钢产量的6%左右,而工业化国家特钢产量占钢产量的比例为10%~20%。我国仍无法应用一些关键特钢品种,在高强度、耐腐蚀、长寿命、减量化等高性能产品研发和生产技术水平方面亟待提高。无论在数量上还是在品种质量上我国特钢发展还有较大的提升空间。
2011年我国粗钢表观消费量为6.83亿t。中国钢铁工业协会预测并推荐“十二五”期间,国内粗钢消费需求量按6.7~7.5亿t考虑,年平均增速约2.6%~4.6%,折算钢材消费需求量为6.3~7.0亿t(不含重复材)。工业和信息化部公布的《钢铁工业“十二五”发展规划》(以下简称《规划》)预测2015年国内钢铁导向性消费量为7.5亿t。而“十一五”期间我国粗钢消费量年均增长率接近12%,“十二五”预测增速比“十一五”期间实际增速大幅下降。在总量增长趋缓的情况下,钢铁工业发展的重点将集中在结构优化、产品和技术升级方面。国务院《关于加快培育和发展战略性新兴产业的决定》着重提出要积极发展高品质特殊钢、新型合金材料、工程塑料材料等先进结构材料。《规划》更明确提出,“十二五”末“进口量较大的高强高韧汽车用钢、硅钢片等品种实现规模化生产,国内市场占有率达到90%以上;船用耐蚀钢、低温压力容器板、高速铁路车轮及车轴钢、高压锅炉管等高端品种自给率达80%;400兆帕及以上高强度螺纹钢筋比例超过80%。”《规划》根据我国经济发展方式转变和产业升级趋势,对2015年关键钢材品种消费进行了综合预测(见表1)。
表1中所列“十二五”期间预测关键钢材品种合计消费量的年均增长率达到14%,远远超过“十二五”粗钢消费总量增长速度的预测,也超过“十一五”时期粗钢消费总量增长的速度。说明我国关键钢材品种消费呈现加速增长趋势,其中主要是高强度、耐热、耐磨、耐蚀的特殊钢,多为含钼钢。根据国际钼协会的统计,钼在钢铁工业中用量最大的是工程钢和不锈钢,分别占到34%和26%。表1中增长幅度最大的高强钢筋、不锈钢,到“十二五”末增长幅度分别达到98.2%和70.2%。
粗钢消费总量增速与特钢消费增速的差异表明,“十二五”期间我国钢材终端消费结构优化升级步伐加快,钢铁工业更要加快实现对高端特钢产品进口替代的目标,因而我国特钢的生产规模和品种质量还将加速提升。另外,从世界钢铁行业发展趋势来看,主要国家将更专注于更高端产品的开发和技术研究,避免低端同质化,追求差异化竞争。这也逼迫我国钢铁工业加大消费升级和产业升级的力度和步伐。我国钢铁工业发展的特点和“十二五”期间结构调整的紧迫任务,为含钼钢开辟了较大的增长空间,将使钼消费继续保持较快增长。
钢铁工业总量规模中远期增长将带动钼消费市场保持长期增长态势
虽然钢铁工业总量规模增长趋缓,但中远期仍将保持增长态势。《规划》根据美、德、日等国钢铁工业发展规律,以及我国工业化、城镇化进程等经济社会发展特点,预测我国粗钢需求量可能在“十二五”期间进入峰值弧顶区,最高峰可能出现在2015~2020年期间,峰值7.7亿~8.2亿t,此后峰值弧顶区仍将持续一个时期。随着我国工业化、城镇化深入发展,以及经济发展方式转变和产业升级,城乡基础设施投资规模增速放缓,钢铁需求将呈逐年下降趋势,进入平稳发展期。
根据上述预测,意味着在未来近20年内,至少在国内钼消费仍将处在一个增长的环境之中。这一推测暂未考虑其他金属对钼的替代作用所带来的钼用量的减少(如铌钢、钒钢、钨硬质合金、钛硬质合金等在一些方面对钼钢及钼合金的挑战),以及钼钢对其他材料的替代和钼材料在化工、电子等更广泛领域的新应用可能带来的钼用量的增加。过去30年里钼在钢铁中的应用比例由80%以上下降到76%左右,说明这些变化一直在进行着。
中国钢铁工业协会基于对下游用钢行业进行的调研,预测下游钢材消费主要行业2015年钢材消费量为6.64亿t(区别于粗钢消费量),2010~2015年年平均增长率为5.4%(见表2)。本文认为分析关注下游用钢领域的总量变化对于分析了解钼消费市场的发展趋势无疑具有一定的参考作用。
结论与建议
伴随着我国成为世界最大的钢铁生产国和消费国,我国也成为了世界最大的钼生产国和消费国,成为影响全球钼消费市场的主要国家。我国钼企业应该加强对国内市场的研究,充分发挥天时、地利、人和的优势,把握我国钢铁工业结构调整、产业升级的重要机遇,合理安排钼产品结构,加强与国内特钢企业的技术合作与信息交流,提高产品质量和适应性,满足我国钢铁消费和产业升级需要的同时,实现钼企业自身的快速发展。钼企业应参照我国钢铁工业发展趋势研究、规划中长期发展战略。充分认识我国钢铁工业总量规模增速趋缓,结构调整和产业升级加快,以及未来20年后可能进入下降通道的发展趋势,坚持科学发展,保持适度的增长规模,并加快钼在新领域应用的研究开发;在专注于钼业的同时,有计划地探索、研究、逐步培育钼以外新的增长领域。
fascin1蛋白篇五
摘要:所谓“礼”, 即是关心他人和让人尊敬, 使之合乎情理。所谓“节”, 是教人要有恰到其分的言谈举止, 使之变得合乎事理。因此, 小到人和人的交流, 大到国家之间的交往, 都必须要遵守商务礼仪规范。在大力提倡精神文明的今天, 作为大学生的我们不仅要学习优秀的传统的礼仪, 还要熟悉当今现代国际通用的基本礼仪。
关键词:商务礼仪;大学生;文化教育;
1.大学生的礼仪修养现状
大学生属于高素质人群, 但为了追随时代潮流或为了彰显个性而忽略必要的礼仪举止。许多不礼貌、不文明, 甚至粗俗、陈腐的东西都被当做了个性的标签。例如, “尊师重教”是我国传统的礼仪, 可许多大学生见老师在讲台前擦黑板却满不在乎;课堂公然睡觉、聊天、看漫画、玩平板, 这是对老师极其的不尊重;更有的学生受到老师的教育时公然顶撞。这些现象表明学生缺少基本的素养与礼仪修养[1]。
2.大学生知礼却不行的原因
2.1 因为害怕出错而不行
知道基本礼仪、也有正确的态度,平时也会约束自己;但是由于立场不够坚定而不敢表达相应的礼仪行为。由于礼仪细节太多或是好多相似之处。这样会使一些缺乏自信的同学认为自己掌握的礼仪知识不全面, 怕出错, 所以就干脆不用, 免得被嘲笑。
2.2 因为太懒而不愿行
由于素养问题, 对自己要求不严格或是成长过程中周围的、家庭的环境影响。已经形成了一些不好的行为习惯, 虽然知道自己做的不得体, 但就是懒得改。由于部分礼仪着眼于细节, 显得比较细微, 而相应的礼仪行为也只表现在小事情上。所以有些大学生就认为不比拘于这些细节, 导致明知善行而因小而不为[2]。
2.3 因为对礼仪的偏见而不行
对礼仪的看法很不赞同, 认为是多余、繁琐的。他们认为商务礼仪是来约束自己的, 妨碍了他们追求自由和内心的想法, 所以就按照自己自以为正确的方式去处事, 而不屑礼仪的正确规范。
2.4 大学生自身认知的不足
当代大学生对自身形象非常关注, 追求时髦得体的着装, 但却没有认识到通过礼仪来展现自己更为重要。甚至一些大学生有错误认识:身着奇装异服以为就是追求“酷”, 不说脏话就认为“落伍”了, 讲文明礼貌看成是“小儿科行为”等。
3.改进大学生商务礼仪教育的措施
3.1 学校应加强培养和教育方案
1)在学习中增强商务礼仪教育的实效性。在我院已经开设公共关系方向专业, 并且学院开设了有关课程, 如:公关礼仪、大学生礼仪、商务礼仪等。在增强大学生礼仪运用的同时, 鼓励大学生在社会空间运用礼仪, 让其在社会中对内协调, 对外沟通。根据交际的具体情况, 灵活的应用商务礼仪知识, 正视自我的礼仪修养, 最终提升自己的礼仪修养。
2)在学校营造良好的礼仪文化氛围。营造良好的校园氛围是加强商务礼仪教育的必须条件, 例如:学校定期开展商务礼仪知识讲坛、观看礼仪录像, 发放礼仪材料;通过校园广播介绍名人处世修身的轶事, 发动师生对不文明现象带来的后果进行反省, 推动学校的文明建设, 营造讲文明、讲礼貌的良好氛围, 让学生在很好的校园环境氛围中得到礼仪修养的熏陶, 提升礼仪素养[3]。
3.2 大学生自身提高商务礼仪的做法
1)严格律己、积极探索。要提高其自身修养, 需要从一点一滴小事情着眼, 从一举一动自身行为着手, 要让自己的行为严格规范起来, 从而将自己的品德修养得到提高, 以适应正在进行深刻变革的社会, “吾日三省吾身”这样的警句时刻要铭记于心, 做一个“思想上虚怀若谷, 行动上登高望远”的人, 只有这样才能提高商务礼仪素养、更好的和社会融入。
2)学习理论知识、积极参加社会实践。积极参加校园或者社会社交活动, 学到更多有用的礼仪行为, 加强商务礼仪知识得学习, 了解世界不同的文化、了解他国的文明礼仪;理论与实践结合, 能更好的提高我们对商务礼仪的兴趣, 让学习变得有趣, 让自己的素质不断提高!
4.现代商务礼仪对大学生的影响
4.1 有助于与他人建立良好的人际关系
学会在交往过程中遵循诚信真挚、相互尊重、言行适度的原则, 就要学习和掌握现代商务礼仪的基本规范, 积累交往经验, 让他们认为你是理解他们、尊重他们、熟悉他们。这样就可以快速的与他人进行良好的人际关系。
4.2 有助于大学生适应社会生活的能力
大学生有走向社会的强烈地愿望, 同时存在心理上的困惑, 比如:如何与领导、同事交流, 如何快速的建立良好人际关系, 如何适应社会生活。商务礼仪教育可以让大学生掌握合乎社会需求的行为准则, 不仅满足大学生走向社会的转变要求, 还可以培养适应社会生活的能力。
4.3 有助于提高大学生思想道德素质
学生接受的是高层次的道德规范教育, 而在行为表达上却连最基础道德的水平都无法达到。系统的礼仪教育能够不断丰富大学生的礼仪知识, 让他们掌握符合社会主义道德要求的礼仪规范, 努力做到“诚于中而行于外, 慧于心而秀于言”, 把人外在的礼仪形式与内在的道德品质有机地统一起来, 成为有较高道德素质的现代文明人和合格的大学生。
参考文献
[1]黄亚兰.大学生对礼仪知而不行的原因和对策分析[j].商场现代化, 2009(10):389-390.[2]康小莉, 云书海.当代大学生礼仪素养缺失的原因及对策探析[j].石家庄学院学报, 2009, 11(1):103-105+112.[3]丁萍.大学生礼仪教育研究[d].山东师范大学, 2010.

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